HuH-7(人肝癌細胞)細胞系
英文名稱 | HuH-7 | 規(guī)格 | 1×106cells |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 貨號 | E-XB6180 |
用途 | 僅供科研研究實驗 | 貨期 | 現(xiàn)貨 |
別稱 HuH-7; HUH-7; HuH7; Huh7; HUH7; JTC-39; Japanese Tissue Culture-39
種屬 人類
年齡（性別） 男性
組織來源 肝；肝癌
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
背景描述 據(jù)說，HuH-7細胞可產(chǎn)甲胎蛋白、胰α抗體、血漿銅藍蛋白、纖維蛋白原、纖維粘連蛋白等。 生長培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例 1:2-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 保藏機構 CCLV; CCLV-RIE 1079 JCRB; JCRB0403 KCB; KCB 200970YJ KCLB; 60104 |
1)復蘇細胞：將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定)，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3)細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
大鼠氣管上皮細胞 | 兔氣管上皮細胞 |
兔滑膜細胞 | 牛骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞 |
兔膀胱平滑肌細胞 | 人肺泡巨噬細胞 |
人前列腺平滑肌細胞 | 人胸腺上皮細胞 |
人乳腺成纖維細胞 | 人胚腎細胞HEK-293A(STR鑒定正確) |
小鼠頜下腺上皮細胞 | 人甲狀腺鱗癌細胞SW579(STR鑒定正確) |
大鼠頜下腺上皮細胞 | 小鼠胚胎成骨細胞前體細胞MC3T3-E1（種屬鑒定） |
兔肌源性干細胞 | 小鼠小腦細胞 C8-D1A（種屬鑒定） |
人前列腺上皮細胞 | 二氫葉還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞CHO/dhFr-（種屬鑒定） |
小鼠腮腺細胞 | 人食管鱗癌細胞KYSE-140(STR鑒定正確) |
大鼠腮腺細胞 | 人骨肉瘤細胞SJSA-1 (STR鑒定正確) |
兔膀胱成纖維細胞 | 人鼻咽癌細胞C666-1(STR鑒定正確) |
人胰島β細胞 | HuH-7(人肝癌細胞)細胞系人非小細胞肺癌細胞NCI-H3122(STR鑒定正確) |
小鼠乳腺上皮細胞 | Expi293F(STR鑒定正確) |
大鼠乳腺上皮細胞 | 人乳腺癌細胞 HS 578T(STR鑒定正確) |
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否*揮發(fā)，細胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。.觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。
9. 注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
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